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Pillar 01

2^N 指数级
超多重数字 PCR

常规多重 PCR 里，一个荧光通道对应一个靶标——想多测一重，就得多加一个通道，而仪器的通道数物理上是有上限的。这条路径的容量增长是线性的。

指数级超多重换了一个思路：把 N 个通道的亮/暗组合本身当作编码位。每个靶标被分配一组独特的通道组合，检测时读的是「组合模式」而非单一通道信号，于是可分辨的靶标空间从 N 变成 2^N。

          ENCODING MATRIX
          CH 01–06 ACTIVE
        

          POSITIVE
          NEGATIVE
          CHANNEL
        

线性方案与指数方案的容量对照
荧光通道数	线性多重（1 通道 = 1 靶标）	指数级超多重（2^N）	倍数差
4	4 重	16 重	4×
6	6 重	64 重	≈ 10.7×
8	8 重	256 重	32×
10	10 重	1 024 重	≈ 102×

注：上表为编码容量上限的理论推演，实际单管检测靶点数受试剂体系、信号分辨能力与算法解码约束，当前平台实现的单管检测范围为 10–100 个靶点。

Pillar 02

ARMS（Amplification Refractory Mutation System）利用引物 3′ 端的碱基配对特异性：只有与模板完全配对时才高效延伸，末端错配则扩增受阻。这一特性让单碱基差异成为可判读的信号。

第三代体系在引物设计、酶体系与缓冲条件上做了系统性优化，把特异性从「能区分」提升到「在野生型背景中仍能优先扩增突变模板」，从而支撑低频突变的检出。

FIG. DROPLET PARTITION

Pillar 03

数字 PCR 的精度来自「分割」：把一份反应体系拆成大量彼此独立的小体积单元，每个单元里目标分子数量服从泊松分布，再通过计数阳性比例反推原始浓度。

「固态油隔水」以固态油相作为分隔介质，把水相反应体系切成稳定的独立单元。相比依赖表面活性剂的乳化体系，固态油相在运输、温控与长时间孵育中更不易合并，反应单元的边界更稳定——这直接决定了定量结果的重复性。

Pillar 04

超多重的价值只有在结果可复现时才成立。把人工节点压到最少，是让方案能进常规实验室的前提。

STEP 01

样本与反应体系在封闭耗材内完成混合，减少开盖操作带来的气溶胶污染风险。

STEP 02

固态油隔水体系将反应分割为独立微单元，随后进入温控循环完成扩增。

STEP 03

逐单元读取各通道的亮/暗状态，输出的是每个单元的完整编码模式，而非单通道强度。

STEP 04

按预设编码表还原靶标身份，结合泊松分布计算各靶标的绝对拷贝数，直接给出浓度结果。